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一次講清酶標(biāo)儀的使用方法

作者:酶標(biāo)儀    時(shí)間:2024-01-03 14:59:02    點(diǎn)擊次數(shù):650
 

  酶標(biāo)儀(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是一種常用的生物化學(xué)分析方法,用于檢測和定量分析樣品中特定物質(zhì)的存在和濃度。下面是酶標(biāo)儀的使用方法的一般步驟:

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  1. 準(zhǔn)備樣品和試劑:收集樣品并進(jìn)行必要的預(yù)處理,如稀釋、提取、去除雜質(zhì)等。同時(shí)準(zhǔn)備好所需的試劑,包括酶標(biāo)板、酶標(biāo)抗體、底物、洗滌緩沖液等。


  2. 酶標(biāo)板涂層:將目標(biāo)抗原或抗體溶液加入酶標(biāo)板孔中,使其吸附在孔底,形成固相。通常需要將酶標(biāo)板放置在4°C的冰箱中一定時(shí)間,使抗原或抗體充分與酶標(biāo)板結(jié)合。


  3. 孔洗滌:在每個(gè)孔中添加洗滌緩沖液,將其倒出,重復(fù)該步驟多次,以去除未結(jié)合的抗原或抗體,減少非特異性背景信號。


  4. 樣品加入:將樣品加入酶標(biāo)板的相應(yīng)孔中,通常有標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品和待測樣品。樣品可以是血清、尿液、細(xì)胞上清等,可以通過稀釋將其加入孔中。


  5. 反應(yīng)孔孵育:將酶標(biāo)板封閉,并將其放入恒溫箱或酶標(biāo)儀中孵育一定時(shí)間,使抗原或抗體與樣品中的目標(biāo)物質(zhì)結(jié)合。


  6. 洗滌:使用洗滌緩沖液洗滌酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的物質(zhì)。


  7. 酶標(biāo)抗體加入:將酶標(biāo)抗體溶液加入酶標(biāo)板的相應(yīng)孔中,使其與樣品中的目標(biāo)物質(zhì)結(jié)合。


  8. 反應(yīng)孔孵育:將酶標(biāo)板封閉,并將其放入恒溫箱或酶標(biāo)儀中孵育一定時(shí)間,使酶標(biāo)抗體與目標(biāo)物質(zhì)結(jié)合。


  9. 洗滌:使用洗滌緩沖液洗滌酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的物質(zhì)。


  10. 底物加入:向每個(gè)孔中加入底物,底物


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