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什么是酶標儀?它的用途是什么?工作原理是什么?

作者:酶標儀    時間:2023-12-28 11:31:22    點擊次數(shù):658
 

  酶標儀(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是一種常用的生物化學分析技術,用于檢測和測量樣品中的特定物質(如蛋白質、抗原、抗體等)的存在和濃度。它的用途廣泛,包括醫(yī)學診斷、生物學研究、食品安全監(jiān)測等領域。

酶標儀

  酶標儀的工作原理基于酶的催化作用和免疫反應原理。下面是酶標儀的基本工作原理:


  1. 固定:首先,在試驗板或試管的表面上涂覆目標物質(如抗原或抗體)。這樣,當樣品中的特定物質與其相結合時,它們將被固定在試驗板或試管的特定位置上。


  2. 結合:接下來,將待測樣品加入試驗板或試管中,樣品中的特定物質(如抗體)與固定在試驗板上的目標物質(如抗原)發(fā)生特異性的結合。


  3. 洗滌:為了去除未結合的物質,需要進行洗滌步驟。洗滌液通過試驗板或試管,將未結合的物質洗掉,只留下特異性結合的物質。


  4. 檢測:然后,加入與待測物質特異性結合的酶標記反應物(如辣根過氧化物酶-HRP),它與特異性結合的物質結合在一起。


  5. 底物添加:加入底物,底物被酶標記反應物催化,產(chǎn)生可測量的信號。常見的底物是類似于四氫吡啶-2-酮(TMB)的物質,它與HRP催化反應后會產(chǎn)生藍色或黃色的產(chǎn)物。


  6. 反應停止:在發(fā)生足夠的顏色反應后,通過添加停止液(如硫酸或酸性溶液)停止酶催化反應。


  7. 讀取:*后,使用酶標儀測量反應產(chǎn)物的光密度或顏色。光密度或顏色的強度與待測物質的濃度成正比,通過與標準曲線對比,可以確定待測樣品中目標物質的濃度。


  總結起來,酶標儀通過特異性結合、酶催化和光密度或顏色測量等步驟,實現(xiàn)了對待測物質的檢測和測量。它的工作原理簡單而靈敏,使其成為許多生物學和醫(yī)學領域中重要的實驗技術。


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