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熒光酶標(biāo)儀與光吸收酶標(biāo)儀原理及區(qū)別

作者:admin    時(shí)間:2021-07-02 01:07:33    點(diǎn)擊次數(shù):1496
 
一、熒光酶標(biāo)儀原理   
       氙氣弧光燈發(fā)出的光經(jīng)過光切割機(jī)變成間歇光,激發(fā)光單色器變成單色光后,這種光就是熒光物質(zhì)的激發(fā)光,被測熒光物質(zhì)被激發(fā),由光照射發(fā)出的熒光經(jīng)單色器轉(zhuǎn)化為單色熒光,然后照射到用于測量樣品的光電倍增管上。由它產(chǎn)生的光電流被放大器放大并發(fā)送到記錄器。激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵由電機(jī)驅(qū)動的凸輪控制。在繪制熒光發(fā)射光譜時(shí),將激發(fā)光單色器的光柵固定在*合適的激發(fā)光波長上,旋轉(zhuǎn)熒光單色器凸輪,改變每個(gè)波長的熒光強(qiáng)度信號輸出到記錄儀,記錄的光譜就是發(fā)射光譜。
 
     在測量熒光激發(fā)光譜時(shí),將熒光單色儀的光柵固定在*合適的熒光波長上,只允許激發(fā)光單色端口的凸輪旋轉(zhuǎn),并將各波長激發(fā)光的強(qiáng)度信號輸出到記錄儀。光譜是激發(fā)。
 
    對樣品溶液進(jìn)行定量分析時(shí),將激發(fā)光單色儀固定在選定的激發(fā)光波長上,將熒光單色儀調(diào)整到選定的熒光波長,記錄儀得到的信號就是樣品溶液的熒光強(qiáng)度。
 
二、光吸收酶標(biāo)儀原理
 
     光是電磁波。波長在100nm-400nm之間的叫紫外光,在400nm - 780nm之間的光可以被人眼觀察到,大于780nm的叫紅外光。光吸收酶標(biāo)儀的原理是檢測分析物在特定波長的吸光度值。jjymafwh
 
     光通過被檢測物體前后的能量差就是被檢測物體吸收的能量。在特定波長下,同一被測物體的濃度與吸收的能量有定量關(guān)系。
 
     在特定波長下,每種物質(zhì)都有自己特定的波長。在這個(gè)波長,物質(zhì)可以吸收*多的光能。如果選擇其他波長波段,檢測結(jié)果會不準(zhǔn)確。因此,在對檢測對象進(jìn)行測量時(shí),我們選擇一個(gè)特定的波長進(jìn)行檢測,稱為測量波長。
 
然而,每種物質(zhì)對光能仍有一定的非特異性吸收。為了消除這種非特異性吸收,我們選擇了一個(gè)參考波長來消除這種不準(zhǔn)確性。在參考波長處,檢測對象的光吸收*小。酶標(biāo)儀在檢測波長和參考波長處的吸光度差可以消除非特異性吸收。

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